- A vizsgálatok a PCR-hoz képest kevésbé specifikusak, mint más szerológiai tesztek, álpozitív  eredményt adhatnak hasonló ellenanyagok jelenléte miatt.

- immunstátusz (a szervezet védekező rendszere) illetve az azt befolyásoló gyógyszerek hatással vannak az ellenanyag képződésre. Nem mindenkinek lesz kimutatható ellenanyag szintje, aki átvészelte a fertőzést.

Lezajlott fertőzés esetén hosszútávú védettség nem feltételezhető jelenlegi tudásunk szerint, ennek  megítéléséhez további kutatások szükségesek.

Amire biztos jó:

- súlyos betegek terápiájaként alkalmazott „reconvalescens plazma” donorok lehetnek a magas ellenanyag szinttel bírók.

- vakcinafejlesztés során a hatásosság ellenőrzésére

- surveillance vizsgálatok- mely során egy adott földrajzi terület/ország megvizsgálhatja, a  lakosság hány % -esett át a fertőzésen

A rutin diagnosztikában alkalmazott szerológiai tesztek különböző típusai:

ELISA (Enzyme- linked immunosorbent assay):

Laboratóriumban végzett kvantitatív (számszerűsített) vagy kvalitatív (pozitív/negatív eredményt ad,  ellenanyag szint számszerű megadása nélkül) teszt 

- minta: teljes vér, plazma, vagy szérum

- vizsgálat ideje: 2-5 óra 

- speciális szaktudást igényel kivitelezése, értékelése

Gyorsdiagnosztikai módszerek:

Gyorsdiagnosztika ellenanyag kimutatással:

Vizsgálat ideje: 10-30 perc

Lateral flow assay (immunkromatográfiás módszeren alapuló gyorsteszt):

A vírusdiagnosztikai teszthez használt membráncsík kromatográfiás rendszerét egy homogén,  porózus, legtöbbször nitrocellulóz membrán képezi, amelyen egy meghatározott régióban rekombináns vírus antigén található, valamilyen színezett konjugátumnhoz (latex szemcsék, fém-kolloid részecskék) kapcsolva. Amikor a tesztcsíkra rámérjük a folyékony fázisban lévő mintát, a minta összetevői a kapilláris erők hatására elkezdenek felfelé vándorolni és kapcsolatba lépnek ezekkel a színezett konjugátumokkal, majd tovább haladnak az „eredmény” régió felé, ahol immobilizált formában elhelyezett „elfogó” ellenanyagokhoz kapcsolódnak. Pozitív eredmény (a páciens mintájában jelen van a vírus antigénjével reagáló ellenanyag) esetén a specifikus immunreakció következtében színes csík látható az „eredmény” régióban. Az elegy a membránon tovább haladva eléri a kontroll régiót, ahol egy újabb sáv jelenik meg a teszt során. Ennek a csíknak a jelenléte a teszt belső kontrolljaként szolgál, s jelzi, hogy a vizsgálatot megfelelően kivitelezték, illetve megfelelő mennyiségű minta került-e a membránra. 

Kis, hordozható eszköz (terhességi tesztekhez hasonló)

forrás: https://en.wikipedia.org/wiki/COVID-19_testing

Kivitelezése egyszerű, kevésbé igényel speciális szaktudást

Minta: teljes vér, újszúrással nyert kapilláris vér

Az ellenanyag jelenlétét mutatja ki az adott mintában (igen/nem)

A vizsgálat eredménye csak a vizsgált személyre vonatkozó adatok (életkor, klinikai tünetek megléte, jellege, megjelenésük ideje) ismeretében értékelhető. A negatív eredmény nem zárja ki, hogy a beteg fertőzött a vírussal. 

Gyorsdiagnosztika vírus antigén kimutatással

- a vírus „spike” antigénjével, egyes tesztek esetében a vírus N antigénjével is komplexet képező  ellenanyag-antigén-ellenanyag komplexet mutatja ki, az e komplex ellen általunk a mintához adott ellenanyag segítségével. Specifikus antitesteket rögzítenek egy hordozó felületére, mely antitestek bizonyos vírusfehérjékkel (antigének) képesek kapcsolódni. Amennyiben a minta tartalmazza a vírust, ezek az antigének (S és N) komplexet képeznek a hordozón megkötött ellenanyagokkal, melyeket egy másodlagos vírus ellen termelt ellenanyag hozzáadásával tudunk kimutatni (ellenanyag-antigén-ellenanyag „szendvics”) 

- a fertőzött állapotot mutatja ki (korai diagnózis lehetősége) néhány nappal a tünetek jelentkezése  előtt, s általában a tünetek kezdete után 7-10 napon belül adhat pozitivitást. 

egyszerű mintavétel- orr-garatból 

-gyors (néhány perc)

-speciális szaktudást kevésbé igényel a kivitelezése, értékelése

-olcsóbb

szenzitivitás teszttől függően nagy variabilitást mutat:

WHO (2020-04-08) szerint jelenlegi tesztek szenzitivitása: 34-80% között- tehát a fertőzöttek akár  50%-át sem ismeri fel 

fals pozitív (nem valódi pozitív) eredmények is gyakoriak lehetnek, mivel a bevitt ellenanyag nem elég  specifikus a SARS-CoV2-re, a hétköznapi náthát okozó koronavírusok fehérjéivel is reagálhat. 

A WHO szerint ezek fejlesztése, szenzitivitásuk fokozása később segítheti majd a diagnosztikát.

Az ábra forrása:  https://diagnostics.roche.com/us/en/products/params/elecsys-anti-sars-cov-2.html#productInfo 

A WHO a gyorsteszteket egyelőre diagnosztikára nem ajánlja

Egyéb megfontolások a gyorstesztekkel kapcsolatban:

A hirtelen támadt nagy igény miatt a piacra úgy kerültek ki tesztek, hogy azok a szokásos  engedélyeztetési eljáráson nem mentek át, a fenti tesztjellemzők bizonyítása csak kis mintaszámon történt. E miatt történhetett meg, hogy több ország (pl.Spanyolország, USA) azzal szembesült, hogy az általuk  vásárolt tesztek nem megbízhatóak, értékelésüket ezért körültekintően kell végezni, az eredményeket pedig fenttartásokkal kell kezelni. Az USA-ban, és a világ más részein engedélyezett tesztek, gyártók listája, a gyártók által megadott  jellemzőik a Johns Hopkins Egyetem hetente 2X frissülő oldalán megtalálhatóak. 

Felelősségi kérdések:

A fals (nem valódi) pozitív eredmény esetén az átvészeltség tudata hamis biztonságérzetet kelt, a  valódi fertőzés diagnózisát késleltetheti! Fals (nem valódi) negatív eredmény esetén az egyén minden beavatkozás nélkül terjeszti a  betegséget. Spanyolország a magán úton végzett teszteket betiltotta a napokban, mivel sok pozitív eredmény nem került be az országos adatbázisba, így a kontaktuskutatás, a betegkövetés és a megfelelő izoláció is elmaradt.

Dr. Bilecz Rita

Mediteam Szeged Zrt.

Felhasznált irodalom:

https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/advice-on-the-use-of-point-of-care-immunodiagnostic-tests-for-covid-19?fbclid=IwAR1PT9yNnwZ2uXhmh1bRMT7Z9quvikN-7Ac5Yk1NgYKMYbaxQgQpdDJD5MU

https://www.centerforhealthsecurity.org/resources/COVID-19/serology/Serology-based-tests-for-COVID-19.html?fbclid=IwAR2lVJi--K_zZ0Ul-KsiBpndsXI1SunjRruf7zHCXFsmgBZ4sFmrsN4PF7c

https://microbioun.blogspot.com/2020/04/test-diagnostico-coronavirus.html?m=1&fbclid=IwAR1pVZ0JdcK2ZXqcAXy9FOClXMfpVwvoczGFP-4_EbwTq1PPt9k9VGqtouM#.Xo0DVdvO8Ec.facebook

https://www.medicaldevice-network.com/features/types-of-covid-19-test-antibody-pcr-antigen/?fbclid=IwAR2EYe06yC4Njt8dKdA1fIt-WIkaVsK-2mpC8qMWB8dkisExFp4pU8iv_X0

https://www.finddx.org/covid-19/

https://spectrum.ieee.org/the-human-os/biomedical/diagnostics/testing-tests-which-covid19-tests-are-most-accurate

https://annals.org/aim/fullarticle/2764737/diagnostic-testing-severe-acute-respiratory-syndrome-related-coronavirus-2-narrative